在3D细胞培养中，无血清添加剂的选择对于细胞的生长、增殖和分化至关重要。以下是一些推荐的无血清添加剂，它们在不同类型的3D细胞培养中可能具有关键作用：

一、生长因子

碱性成纤维生长因子（bFGF）

作用：具有强烈的血管生成作用，能刺激细胞增殖、迁移，诱导纤溶酶原激活物及胶原酶活性。

应用：在细胞大规模培养领域，bFGF是胚胎干细胞培养基中的一个重要成分，它可以使干细胞在无血清培养基中保持未分化的状态。

胰岛素样生长因子-I（IGF-I）

作用：介导垂体生长激素的蛋白质合成代谢和促进作用，还可通过与IGF-I受体结合影响糖原代谢、DNA合成和葡萄糖摄取。

应用：在含有IGF-I和转铁蛋白的无血清培养基中，IGF-I受体高表达的细胞能维持较高的活率，且可保持持续增殖的能力。

表皮生长因子（EGF）

作用：通过与细胞表面的受体结合，促进细胞的增殖及分化。

应用：在无血清细胞培养基中，添加适量的EGF可以明显增强细胞的增殖能力。同时，EGF还具有促进细胞黏附和迁移的作用。

肝细胞生长因子（HGF）

作用：具有显著的促细胞分裂、细胞运动及血管生成作用。

应用：能够刺激原代无血清培养的肝细胞DNA的合成，对多种组织器官的生长发育有重要的生理调节功能。

二、激素

胰岛素

作用：维持细胞生长，调节细胞对葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的摄取、利用和贮存，同时抑制糖原、蛋白质和脂肪的分解。

应用：通常以每升1到10mg的浓度添加到细胞培养基中。

三、其他添加剂

转铁蛋白

作用：通过与转铁蛋白受体结合，将铁离子转运并释放到细胞内，维持细胞生长和增殖的功能。

应用：无血清培养基必不可少的添加物，不同细胞培养体系所需添加转铁蛋白量会有所不同。

白蛋白

作用：具有多种生理功能，包括金属离子结合剂、自由基清除剂、渗透压和pH值的调节剂、生长因子的运载体、表面活性剂以及营养剂等。

应用：为细胞提供必需氨基酸和生长因子等，促进细胞存活和增殖。

四、综合补充剂

ITS（Insulin-Transferrin-Selenium）

特点：不含动物血清，降低了细胞培养过程中潜在的病原体污染风险；提供了细胞生长所需的激素、生长因子、微量元素和维生素等营养成分；能够有效促进细胞的增殖和分化，尤其适用于对血清敏感或依赖性细胞系。

应用：适用于多种类型的细胞培养，特别是对于需要特定生长因子和微量元素的细胞，如原代细胞、干细胞和某些特殊类型的癌细胞。

B-27

特点：含有多种维生素、激素、生长因子和其他营养成分，这些成分对于神经细胞的生长至关重要；能够显著提高神经元的存活率，减少细胞凋亡；有助于神经突触的形成和成熟。

应用：常用于神经细胞培养，适用于神经元的生长和存活，类器官的培养及IPS多能干细胞的诱导和分化。

KOSR（KnockOut Serum Replacement）

特点：含有多种生长因子、激素和营养物质，能够支持多种细胞类型的生长和增殖；内毒素水平较低，有助于减少细胞培养中的污染风险；不含动物源性成分，适合用于需要避免动物源性污染的细胞培养。

应用：常在IPS多能细胞中替代血清组分，特别适用于某些对血清成分敏感的细胞类型，如干细胞和某些原代细胞。

请注意，在选择无血清添加剂时，需要根据细胞类型和实验需求来确定最合适的添加剂组合。同时，无血清培养基的配方可能需要根据细胞的特定生长需求进行个性化调整。